Introducción

La calidad de la semilla se analiza a través de diferentes pruebas donde se obtiene información sobre las características genéticas, físicas, fisiológicas y sanitarias de las semillas. Se pueden utilizar varias pruebas para la evaluación y los parámetros varían según la especie y el protocolo seguido.

Obtención de uma muestra de trabajo

Obtener una muestra de tamaño adecuado para las pruebas, en la que estén presentes los mismos componentes del lote de semillas y en proporciones similares.

División o cuarteo de semillas para obtener muestras homogéneas, cuarteador, modelo R-TE-064 y R-TE-066.

Pesaje de lotes y muestras para análisis, como pruebas de humedad y análisis de pureza, balanza de precisión y balanza analítica.

Calidad del agua

El agua utilizada para el análisis de semillas debe estar libre de impurezas orgánicas e inorgánicas; se recomienda el uso de agua destilada, con un pH de 6,0-7,5.
Destilador de agua, modelos TE-1782, tipo pilsen como el TE-2755. Otra opción es el uso de ósmosis inversa para la purificación del agua, que es capaz de proporcionar agua de la mejor calidad, y posee un menor consumo de agua.

Análisis de pureza

Determinación de la composición porcentual en peso, identidad de las diferentes especies de semillas, material inerte de la muestra y por inferencia al lote de semillas.

Identificación de semillas, separación de semillas pequeñas y/o unidades de dispersión, fragmentos y revisión de muestras de semillas forrajeras, microscopio estereoscópio. 

Prueba de humidad

Determinación del contenido de humedad de las semillas por el método de la estufa, donde el agua contenida se extrae en forma de vapor mediante la aplicación de calor en condiciones controladas.
Molienda: las semillas grandes y las semillas de tegumento que evitan la pérdida de agua deben triturarse antes del secado a menos que su alto contenido de aceite dificulte esta operación, y posterior tamizado.

El molino y el modelo ajustables varían según la especie, pero se pueden utilizar lo molino multiuso, modelo TE-631/4 y moinho tecmill, modelo R-TE-633.

Teste de umidade

Tamices con aperturas de 0,50 mm; 1,00 mm, 2,00 mm e 4,00 mm Secado de semillas: Estufas con circulación y renovación de aire, modelos TE-394/1-MP (64 litros), TE-394/2-MP (220 litros), TE-394/3-MP (528 litros), TE-394/4-MP (1.152 litros).

Desecador al vacio, modelo TE-3950/1.

Pesaje: balanzas semianalítica o analítica.

Prueba de germinación

La germinación de semillas en las pruebas de laboratorio es la aparición y el desarrollo de estructuras esenciales del embrión, demostrando su capacidad para producir una planta normal en condiciones favorables de campo.
Para algunas especies, es necesario romper la latencia (fisiológica y física) antes de la prueba de germinación, utilizando algunos métodos como se describe a continuación:

Pre-enfriamiento (temperatura de 5-10°C): cámara de conservación, modelo TE-385 o cámara fría con controle de temperatura, modelo TE-4030/1.

Teste de germinación

Escarificación química con ácido sulfúrico: campana de extracción de gases.

Esterilización de arena, papel o sustrato utilizado para la germinación de semillas: autoclave vertical.  

Cámaras de germinación utilizadas para el acondicionamiento de las semillas durante la prueba:

Prueba de vigor

Prueba relacionada con la capacidad de las semillas para germinar y producir una plántula normal en una amplia gama de condiciones de campo.
Recomendado para evaluar o detectar diferencias significativas en la calidad fisiológica de semillas con tasas de germinación similares, clasificar lotes de vigor alto y bajo y detectar con precisión avances en el deterioro de semillas. No existe un método estandarizado que pueda recomendarse para todas las especies.

A continuación, las pruebas más extendidas:

Prueba de envejecimiento acelerado (soya, sorgo, frijol, maíz, trigo, algodón, etc.): evaluar el grado de tolerancia de las semillas a alta humedad relativa y temperatura, considerando que las semillas de mayor vigor tienen mayor germinación luego de este procedimiento. Las semillas se colocan en recipientes que contienen agua o solución salina y se envejecen en cámara para envejecimjento de semillas, modelo TE-410 y, posteriormente, sometidas a la prueba de germinación, evaluándose el porcentaje promedio de plántulas normales.

Prueba de tetrazolio (soya, sorgo etc.): muy utilizado en el control de calidad, determina indirectamente la actividad respiratoria en las células que componen los tejidos de la semilla. Las semillas deben empacarse en papel de germinación humedecido con agua y mantenerse en incubadora, modelo TE-371/240L, posteriormente sumergidas en la solución de tetrazolio. Después de la tinción, las semillas se lavan y se evalúan individualmente.

Prueba de conductividad eléctrica: con el deterioro de la semilla se produce la lixiviación de sus constituyentes celulares, por lo que cuanto mayor es el valor de la conductividad eléctrica de la solución, menos vigorosas son las semillas. Las semillas se pesan y se sumergen en agua desionizada.
Las muestras se mantienen en cámara de germinación y posteriormente se determina la conductividad eléctrica de la solución utilizando un conductivímetro digital, modelo TEC-4/1-MP.

Prueba de frio: utilizado para evaluar la calidad fisiológica de la semilla en condiciones adversas, siendo utilizado en regiones de clima templado, donde la siembra se realiza a baja temperatura (generalmente a partir de 10°C). La metodología es generalmente similar a la prueba de germinación a una temperatura más baja, seguida de la prueba de germinación. Se pueden usar las cámaras, modelos TE-402/240L, TE-4030/1, TE-409, TE-4020/240L.

Teste de sanidade

La sanidad de la semilla se refiere a la presencia o ausencia de agentes patógenos, como hongos, bacterias, virus, nematodos e insectos. La elección del método depende del patógeno, el tipo de asociación patógeno/semilla, la especie de semilla y el propósito de la prueba.

Las condiciones para realizar la prueba deben seguir estándares específicos, por debajo de algunos equipos que pueden ser necesarios:

Almacenamiento de la muestra en una cámara fría y seca (temperatura 5-18 ° C y humedad relativa por debajo del 50%) durante seis meses

después del análisis, cámara de conservación, modelo TE-385 o cámara fría con control de temperatura, modelo TE-4030/1.

Esterilización de materiales y vidrierías: estufa para secado y esterilización, modelo TE-393/80L o TE-393/180L.

Preparación de medios de cultura: agitador magnético con calentamiento, modelo TE-0854 y medidor de pH microprocessado, modelo R-TEC-7/3-MP.

Esterilización del medio de cultura: autoclave vertical.

Cámara de incubación: incubadora, modelo TE-371/240L; estufa bacteriológica, modelo TE-392/93L.

Microscopio: manipulación de muestras con microorganismos: cabina de bioseguridad.

Conteo de bacterias: contador digital de colonias, modelo CP-600/1.

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Referencias:
BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Regras Para Análise de Sementes. Brasília, DF: MAPA/DAS/ACS. 2009. 399 p.
ISTA. International Rules for Seed Testing. Bassersdorf: International Seed Testing Association, 2017. 296p.